Инновации в очистке моноклональных антител

Добавить в избранное
119234, Россия, Москва,
Ленинские горы, 1 стр.11

Связаться с нами
info@bcmst.ru

+7 (495) 939-59-67
+7 (495) 939-58-06

Инновации в очистке моноклональных антител

Технология выделения и очистки моноклональных антител содержит ряд устоявшихся стадий, в последовательности:

  • аффинная хроматография на сорбенте с протеином А;

  • вирусная инактивация;

  • хроматографическая очистка (до 3-х стадий в зависимости от сложности сконструированного антитела);

  • вирусная фильтрация;

  • ультрафильтрация и стерилизующая фильтрация.

Лекарственный препараты на основе моноклональных антител находятся в первой десятке препаратов по объему продаж, а количество таких препаратов непрерывно возрастает.

Очистка моноклональных антителПоэтому оптимизация каждой стадии и технологической платформы в целом является актуальной задачей и на это направлены усилия целого ряда компаний.

Мы представляем компании Chromacon (Швейцария) и JSR (Бельгия-Япония-Канада), которые совместными усилиями создали принципиально новую технологическую платформу и продолжают ее развивать.

 Цель – создание непрерывного технологического процесса с увеличенной производительностью и выходом целевого продукта за счет использования многоколоночных технологий и новых мембранных сорбционных материалов на стадиях аффинной, ионообменной хроматографии и вирусной фильтрации.

Что мы можем предложить на сегодняшний день для совершенствования технологии выделения и очистки моноклональных антител.

Для стадии аффинной хроматографии компания JSR Micro разработала сорбент с протеином А, иммобилизованным на метакрилатной гидрофилизованной основе. По своим характеристикам (динамическая емкость, отделение белков-хозяев, устойчивость при регенерации в щелочи) он превосходит, как известные сорбенты на основе сефарозы, так и аналогичные сорбенты на полимерной основе (см. сравнительные результаты в приложении «Amsphere A3»)

Затраты на этой стадии определяются стоимостью аффинного сорбента, поэтому снижение расхода сорбента исключительно актуально. Этого можно достичь, используя технологию CaptureSMB®, разработанную компанией Chromacon в варианте двухколоночной хроматографии.

Batch процесс_очистка моноклональных антителВ традиционном варианте хроматографии проскок наступает при не полном заполнении колонки, что снижает эффективность его использования и, соответственно, производительность процесса. Кроме того, традиционный процесс прерывается на стадию регенерации.





Использование второй колонки позволяет полностью насытить сорбент в первой колонке и элюировать продукт во время заполнения второй колонки. Затем колонки «меняются позициями» и процесс продолжается непрерывно.

CaptureSMB процесс_очистка моноклональных антител


Такой подход позволяет вдвое увеличить производительность или на 40% уменьшить затраты на сорбент.

Существенно, что двухколоночный процесс фирмы Chromacon эффективней аналогичного трехколоночного процесса фирмы GE и четырехколоночного фирмы Novosep.

Разработка препаратов на основе моноклональных антител ведет к усложнению их конструкции и для некоторых типов вновь разработанных препаратов традиционный хроматографический процесс не позволяет выделит целевой продукт с выходом более 35%.






Превосходство двухколоночного хроматографического процессаContichrom_очистка моноклональных антител

Масштабирование с ContichromРазработанный фирмой Chromacon двухколоночный MCSGP® процесс позволяет значительно повысить выход. Для приведенной ниже конструкции выход увеличен на 80%. 

Исследования процессов очистки антител аффинной хроматографией в режиме CaptureSMB и ионообменной в режиме MCSGP можно осуществить в лабораторном масштабе на оборудовании Contichrom Cube, а в промышленном масштабе на оборудовании EcoPrime Twin в GMP исполнении.






Мы предлагаем услугу по предварительному исследованию этих процессов на оборудовании Contichrom Lab-10, имеющемся в нашей лаборатории.

Для стадии вирусной фильтрации, отделения белков-хозяев, ДНК и очистки от агрегатов предложены инновационные мембранные сорберы Natrix (JSR Micro и фирма Natrix, Канада). Ниже приведены данные, демонстрирующие высокую эффективность удаления ДНК и снижение концентрации модельных вирусов на 5-6 порядков на мембранах с четвертичными аминогруппами.

Приведенные данные демонстрируют возможность высоких скоростей пропускания раствора антител (до 10 объемов мембранного картриджа в минуту) при сохранении эффективности. Детальное описание ассортимента и областей применения мембранных сорберов см. в приложении ( «Natrix»).



HD-Q, очистка моноклональных антителMuLV_PRV_Reo-3_очистка моноклональных антител

HB-Sb_Очистка мноклональных антител

Мембранные сорберы способны работать не только в режиме «flow-throught», но и в хроматографическом режиме на стадии ионообменной хроматографии, например, при отделении агрегатов. Мембрана со смешанным слоем (сульфо- и бутильные группы) исключительно эффективно отделяет агрегаты.

Сорберы  Natrix валидированы для применения в производстве моноклональных антител и применяются как одноразовые изделия, что существенно экономит время и финансы на проведение целого ряда необходимы в производстве контрольных процедур.

Таким образом, в настоящее время мы готовы предложит целый ряд оригинальных инновационных подходов для улучшения технологических характеристик процесса выделения и очистки моноклональных антител.

Будущее развитие описываемой платформы разработчики связывают с переходом исключительно на мембранные хроматографические процессы, как на стадии аффинной хроматографии, так и на стадии ионообменной очистки.

 



Дополнительная литература