Модульные аминокислотные анализаторы
Аминокислоты – важнейшие компоненты продуктов растительного и животного происхождения, которые играют большую роль при обмене веществ в организмах, при формировании белков и пептидов, в биохимическом синтезе витаминов, гормонов, ферментов и т. д. Последовательность аминокислот определяет структуру генетического кода организмов. Наряду с двадцатью важнейшими аминокислотами, принимающих участие в синтезе белков, существует более сотни природных аминокислот, которые встречаются в клетках, тканях и физиологических жидкостях.
Количественный анализ аминокислот имеет большое значение во многих естественнонаучных исследованиях, особенно в медицине, фармацевтике и пищевой промышленности. Аминокислотный анализ в клинической диагностике применяется главным образом для обнаружения наследственных заболеваний и нарушений обмена веществ. В биофармацевтической промышленности определение аминокислот является важным этапом на всех стадиях производства препаратов на основе белков. Основная задача анализа аминокислот в пищевой промышленности – контроль качества продуктов питания и оценка питательности кормов для животных. Аминокислотный анализ дает абсолютное и точное значение содержания белка, тогда как определение белка по количеству азота может приводить к искажению результатов.
Фирма KNAUER перешла на производство модульных аминокислотных анализаторов. На базе блоков и устройств фирмы созданы аминокислотные анализаторы классического метода с постколоночной дериватизацией нингидрином, а также анализаторы с предколоночной дериватизацией ОРА и FMOC реагентами. Это превращает аминокислотный анализатор в универсальный прибор, позволяющий использовать его не только для анализа аминокислот, но как обычный градиентный ВЭЖХ хроматограф.
Модульная система с постколоночной дериватизацией нингидрином
Классический аминокислотный анализатор для разделением свободных аминокислот на катионообменнике в ступенчатом градиенте рН с последующей постколоночной дериватизацией нингидрином /Speckman, Stein и Moore, 1958/. Предел обнаружения 100 pmol. Детектирование 440 и 570 нм. Является рефересным методом в клиническом и генетическом скрининге (до 40 или 53 аминокислот), а также в анализе кормов и продуктов питания (18 аминокислот в соответствии с EU Commission Directive 98/64/EC).
Для каждого из перечисленных применений прибор комплектуется набором с колонкой, предколонкой, комплектом готовых буферных растворов и стандартами.
Для автоматическог ввода пробы может быть установлен автосамплер.
Модульные системы с предколоночной дериватизацией флуоресцентными реагентами
Флуоресцентные реагенты, такие как ОРА, FMOC, PITC, dansyl CI или NBD CI используются для предколоночной дериватизации свободных аминокислот для увеличения чувствительности определения в сравнении с классическим методом за счет использования флуоресцентного детектора. Разделение производных осуществляется в бинарном градиенте на обращено фазовых колонках. Метод используется как в анализе гидролизатов белков, так и при исследовании физиологических жидкостей (до 30 аминокислот).
Фирма KNAUER предлагает оборудование, оптимизированное для работы с ОРА и FMOC реагентами в автоматическом режиме, оптимизированные для анализа 20-30 аминокислот. По запросу может быть оказана помощь в комплектации и методическом обеспечении других известных подходов.
|